ODCZYNNIKI DO EKSPLOATACJI CYTOMETRÓW I SORTERÓW

Prawidłowa eksploatacja cytometrów przepływowych i sorterów komórkowych wymaga przede wszystkim regularnego płukania i/lub czyszczenia układu ciśnieniowo-cieczowego instrumentów. Najważniejszym aspektem tych zabiegów eksploatacyjnych jest zapobieganie tworzenia biofilmów mikrobiologicznych w kapilarach i przewodach urządzeń oraz wytrącania się soli z płynu osłonowego.

Równie ważnym elementem jest tzw. kontrola jakości – quality control (QC), która wpisuje się w zasady dobrej praktyki cytometrycznej. QC w cytometrii przepływowej jest niezbędna, aby zapewnić dokładne, wiarygodne i powtarzalne dane z eksperymentów. Obejmuje ona szereg praktyk, protokołów i kontroli mających na celu weryfikację, czy cytometr przepływowy działa optymalnie oraz czy wyniki eksperymentów są spójne w czasie i między różnymi urządzeniami. Składają się na nią:

• kalibracja i standaryzacja instrumentów,

• monitoring funkcji (czułości, stabilności oraz ustawień kompensacji instrumentu w czasie),

• kompensacja fluorescencji,

• kontrola jakości przeciwciał i odczynników,

• standaryzacja protokołów akwizycji danych,

• monitoring analizy danych (powtarzalność wyników oraz tworzenie standardowe procedur działania dla poszczególnych aplikacji (SOP – Standard Operating Procedures)),

• monitoring prawidłowej eksploatacji oraz detekcja i rozwiązywanie problemów.

W portfolio SONY Biotechnology oraz Thermo Fisher Scientific znajdują się następujące materiały i odczynniki gwarantujące prawidłową eksploatację i kontrolę jakości instrumentów:

• DPBS, no calcium, no magnesium (Thermo Fisher Scientific) – nr kat. 14190144

  Stanowi zrównoważony roztwór PBS bez jonów wapnia i magnezu w celu ograniczenia agregacji komórek oraz wytrącania soli w przewodach i kapilarach instrumentów (zwłaszcza w miejscach powiązanych z optyką).

• DPBS (10X), no calcium, no magnesium (Thermo Fisher Scientific) – nr kat. 14190144

  Stanowi zrównoważony 10-krotnie stężony roztwór PBS bez jonów wapnia i magnezu.

• BrightComp eBeads™ Compensation Bead Kits (Thermo Fisher Scientific) – nr kat. A10514

  Roztwór zawierający kulki kalibracyjne zapewniające spójne, dokładne i proste w użyciu ustawienia kompensacji w cytometrii przepływowej.

• 10X ClearSort™ Sheath Fluid, Sterile, 4 x 1L (SONY Biotechnology) – nr kat. AE700713

  Stanowi zrównoważony roztwór PBS nie zawierający azydku sodu

• Automatic Setup Beads Kit (SONY Biotechnology) – nr kat. LE-B3001

  Roztwór zawierający kulki kalibracyjne do kalibracji parametrów analizy i sortowania instrumentów SONY Biotechnology.

• AccuCheck Counting Beads (Thermo Fisher Scientific) – nr kat. PCB100

  to efektywna jednoplatformowa metoda do bezwzględnego liczenia komórek, łącząca zalety bezpośredniego immunofenotypowania cytometrycznego z użyciem dwóch różnych sub-populacji kulek fluorescencyjnych. Stanowią podwójny standard wewnętrzny do pomiaru stężenia komórek krwi.

• 123count eBeads™ Counting Beads (Thermo Fisher Scientific) – nr kat. 01-1234-42

  przeznaczone do bezwzględnego liczenia komórek lub innych cząstek za pomocą cytometrii przepływowej. Umożliwiają precyzyjne liczenie komórek i pomiar ich stężenia.

• UltraComp eBeads™ Compensation Beads (Thermo Fisher Scientific) – nr kat. 01-2222-42

  wiążą się z przeciwciałami niezależnie od łańcucha lekkiego immunoglobulin. Zostały zaprojektowane do kompensacji z użyciem wszystkich fluorochromów wzbudzanych przez lasery ultrafioletowe (355 nm), fioletowe (405 nm), niebieskie (488 nm), zielone (532 nm), żółto-zielone (561 nm) oraz czerwone (633-640 nm).

• OneComp eBeads™ Compensation Beads (Thermo Fisher Scientific) – nr kat. 01-1111-42

  wiążą się z przeciwciałami niezależnie od łańcucha lekkiego immunoglobulin. mogą być barwione pojedynczymi przeciwciałami sprzężonymi z fluorochromem, służąc jako jednokolorowe kontrole kompensacyjne.

• 8 Peak Beads (SONY Biotechnology) – nr kat. AE700522

  umożliwiają testowanie czułości oraz rozdzielczości uzyskiwanych wyników pomiaru fluorescencji.

• Sodium hypochlorite, 10-15% active chlorine, Thermo Scientific Chemicals (Thermo Fisher Scientific) – nr kat. 219250100

  stężony roztwór podchlorynu sodu do sterylizacji linii próbki cytometrów przepływowych – zalecane stężenie końcowe to zakres od 0,7 – 2%.

• Attune™ Wash Solution (Thermo Fisher Scientific) – nr kat. J24974

  zoptymalizowany bufor myjący wykorzystywany do utrzymania czystości linii próbki, minimalizując zanieczyszczenia (chemiczne, mikrobiologiczne oraz przenoszenie materaiału pomiędzy próbkami).

• Attune™ Debubble Solution (1X) (Thermo Fisher Scientific) – nr kat. A10496

  roztwór umożliwiający usuwanie pęcherzyków powietrza z układu ciśnieniowo-cieczowego cytometrów.

prof. dr hab. Wojciech Juzwa
aplikacje@cyto-logic.pl
+48 889 735 598